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一、背景介紹

結核分枝桿菌耐藥性的產生及其引起的耐藥結核病的流行,已經成為國內外高度關注的嚴重影響結核病防治效果的問題。開展藥物敏感性試驗和耐藥性監測,對了解結核分枝桿菌的耐藥狀況、指導臨床治療、以及研究耐藥發生機制、有效控制耐藥結核病的流行具有非常重要的意義。

體外抗菌藥物敏感性試驗簡稱藥敏試驗(AST),是指在體外測定藥物抑菌或殺菌能力的試驗。藥敏實驗可以相對快速有效地檢測病原菌對各種抗菌藥的敏感性,其目的是了解病原微生物對各種抗生素的敏感程度,以指導臨床合理選用抗生素藥物的微生物學試驗。

固體培養法這是目前結核病實驗室常用的細菌學藥敏試驗方法,包括比例法( method of proportion,MOP) 和絕對濃度法,分別由法國學者G.Canetti 和德國學者G.Meissner 于1963 年首先提出。比例法是世界衛生組織推薦的藥敏試驗方法,也是目前我國流行病學監測和耐多藥結核病規劃管理項目所采取的方法。比例法是將結核分枝桿菌菌液稀釋成不同的濃度,接種在相同濃度的含藥羅氏培養基上,通過計算耐藥菌的比例,來判斷細菌是否耐藥。

在我國,各省、直轄市、自治區疾病預防控制中心及胸科/傳染病醫院是開展結核病研究和藥敏試驗的主要單位。收集培養的結核桿菌樣本,要進行后續的藥敏試驗,細菌樣品的分散尤為關鍵。傳統方法通常是通過挑取培養的細菌進行研磨分散,反復加液比濁,直至將所有的樣本均調節到同一麥氏濁度,然后進行后續的藥敏試驗。

超聲細菌分散計數儀是一款基于超聲分散和光電濁度檢測原理的菌液前處理儀器。該儀器與傳統的手工分散方法相比,它能更快更好地實現菌落分散和濁度檢測一體化,同時智能提示稀釋到標準麥氏濁度菌懸液所需的稀釋體積。是一款高效率解放雙手的同時還不影響菌株活性和藥敏試驗結果的智能儀器,在微生物實驗前處理中具有較高的應用價值。



二、超聲分散處理結核桿菌的優點


1. 工作原理

通過壓電陶瓷換能器將高頻電能轉化為超聲波聲能,由超聲波擊錘將超聲波聲能傳遞到比色皿,在不損傷樣品的前提下,實現比色皿中成團細菌的超聲波均勻分散,然后光源產生的光線透過比色皿照在傳感器上,通過傳感器讀取透射光的強度,將樣品與標準物質對比,實現樣品麥氏濁度測量,并基于樣品麥氏濁度和算法給出稀釋到目標濁度所需加液體積,并對樣品菌落數進行初步估計。


2. 菌液制備過程對比

序號超聲分散研磨瓶分散
1參數設置(0.5min)/
2

細菌挑取(1min)

細菌挑取(1min)
3超聲分散、比濁(1-3min)
漩渦震蕩、研磨(1-2min)
4菌液靜置,轉移到比濁管(15min)
5添加生理鹽水比濁(2min)
6根據稀釋體積提示添加生理鹽水(0.5min),制備出標準濁度菌懸液反復加液,比濁(2-5min),制備出標準濁度菌懸液
總耗時3-5min23-27min


3.分散效果對比



三、應用領域

1. 水處理、固液分散、溶液中顆粒的解團聚實驗;

2. 分枝桿菌、腸桿菌、葡萄球菌等微生物藥敏試驗的菌懸液制備;

3. 生物制品研發及細菌培養分散及濁度檢測實驗;

4. 食品微生物限度等檢測實驗。


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參考文獻:

1.   穆成. 結核分枝桿菌藥敏試驗表型檢測法的新進展[J]. 中國衛生檢驗雜志, 2015, 25(10):1678-1680.

2.    郭明日, 張麗霞. 非結核分枝桿菌病實驗室診斷技術及藥敏試驗研究進展[J]. 淮海醫藥, 2017, 35(2): 246-249. 

3.    郭以河. MTT法體外藥敏試驗研究進展及臨床應用[J]. 東南國防醫藥, 2005, 7(1): 77-78. 


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